Saznajte o laboratorijskim kromatografskim stupcima

Akromatografski stupacTehnika razdvajanja temelji se na različitim koeficijentima particije između fiksne faze i mobilne faze u smjesi. Stacionarna faza obično je adsorbent, poput silikagela, glinice, poliamida itd., Koji se ravnomjerno ispunjava u kromatografskom stupcu. Mobilna faza je otapalo koje smjesu unosi u kromatografski stupac, poznat i kao Eluenter. Kako se mobilna faza kreće u kromatografskom stupcu, svaka komponenta ostaje u fiksnoj fazi u različito vrijeme zbog razlike koeficijenta particije, tako da se postigne odvajanje.

Kao važan alat za odvajanje, laboratorijski kromatografski stupac igra vitalnu ulogu u kemijskim, biološkim, farmaceutskim i drugim poljima. Na temelju principa kromatografije, odvajanje svake komponente u smjesi može se učinkovito ostvariti primjenom razlike koeficijenta particije, adsorpcijskog kapaciteta i topljivosti različitih tvari između fiksne faze i mobilne faze. Ovaj će rad detaljno uvesti osnovni princip, vrstu, metodu odabira, postupak rada i primjenu u različitim područjima laboratorijskog kromatografskog stupca.

Laboratorijski kromatografski stupci mogu se podijeliti u mnoge vrste prema njihovom principu djelovanja, punjenja materijala, oblika i veličine.

◆ Klasifikacija prema načelu djelovanja

1) Adsorpcijska kromatografija stupaca: Adsorbent se koristi za odvajanje razlike u adsorpcijskom kapacitetu svake komponente smjese. Izbor adsorbensa ovisi o prirodi tvari koja se odvaja, poput silikagela, prikladan je za odvajanje nepolarnih i polarnih spojeva, a glinica je prikladna za različite vrste spojeva prema kiselini i alkaliji.

2) Kromatografija s particijskim stupcem: Smjesa je odvojena prema razlici u koeficijentu particije između fiksnih i mobilnih faza. Kromatografija s particijskim stupcem obično koristi sustav otapala kao mobilnu fazu i prilagođava koeficijent particije promjenom sastava otapala.

3) Kromatografija stupca ionske razmjene: Selektivna adsorpcija i oslobađanje iona u smjesi odvojena je ionskom smolom. Smole za razmjenu iona imaju specifične skupine za razmjenu iona koje mogu razmjenjivati ​​ioni u odvojenoj tvari.

◆ Poredaj do punjenja materijala

1) Stupac od silikagela: silika gel je najčešće korišteni adsorbent, pogodan za odvajanje raznih organskih tvari. Silikonski stupovi imaju izvrsnu toplinsku i kemijsku stabilnost i mogu se koristiti u širokom rasponu pH.

2) Stupac glinice: Stupac glinice podijeljen je u kiseli, alkalni i neutralni stupac glinice prema kiselini i alkalijama, pogodan za različite vrste razdvajanja spoja. Stupac glinice ima snažnu adsorpcijsku sposobnost za polarne tvari.

3) Poliamidni stupac: Poliamidni stupac ima funkciju adsorpcijske kromatografije i particijske kromatografije, a pogodan je za odvajanje spojeva koji mogu tvoriti vodikove veze s poliamidom, poput fenola, kiselina, kinona itd.

◆ Poredaj prema obliku i veličini

1) STAkle stupac: Vrsta kromatografskog stupca koji se obično koristi u laboratorijima, s prednostima transparentnosti i lako promatranje. Veličina staklenog stupca određuje se prema količini materijala koji treba odvojiti i stupnju poteškoća u razdvajanju, a omjer promjera i visine uglavnom je između 1: 8 i 1:50.

2) Stupac od nehrđajućeg čelika: Stupac od nehrđajućeg čelika ima prednosti otpornosti na koroziju i otpornosti na tlak, što je pogodno za kromatografske sustave visokog pritiska. Upotreba stupaca od nehrđajućeg čelika relativno je rijetka, ali ima prednosti u određenim uvjetima.

Odabir prikladnog kromatografskog stupca presudan je za postizanje učinkovitog razdvajanja. Prilikom odabira kromatografskih stupaca potrebno je uzeti u obzir sljedeće čimbenike:

Laboratorijski kromatografski stupci imaju širok raspon primjena u više polja, uključujući, ali ne ograničavajući se na sljedeće:

◆ Odvajanje proteina i pročišćavanje: Kromatografski stupac jedan je od važnih alata za odvajanje i pročišćavanje proteina. Prema razlikama veličine proteina, svojstva naboja i afiniteta, za odvajanje i pročišćavanje mogu se odabrati različite kromatografske metode. Na primjer, kromatografija stupca ionske razmjene prikladna je za proteine ​​odvojene svojstvima naboja; Kromatografija afiniteta Kolumna koristi specifična svojstva vezanja za izoliranje i pročišćavanje ciljnih proteina.

◆ Odvajanje nukleinskih kiselina: Kromatografski stupci mogu se koristiti i za odvajanje nukleinskih kiselina. Kroz specifične kromatografske metode, molekule nukleinskih kiselina različitih duljina i struktura (poput fragmenata DNA i molekula RNA) mogu se učinkovito razdvojiti u stupcu kako bi se zadovoljile potrebe analize naknadne nukleinske kiseline, sekvenciranja i drugih eksperimenata.

◆ Odvajanje spojeva malih molekula: Intermedijari lijekova, komponente male molekule u prirodnim proizvodima itd. Mogu se odvojiti uz pomoć kromatografskih stupova. Prema razlikama koeficijenta particije između fiksne faze i mobilne faze, za odvajanje i pročišćavanje spojeva malih molekula može se odabrati odgovarajuća kromatografska metoda. Na primjer, silikagel s reverznom fazom prikladan je za odvajanje lipofilnih malih molekula; Normalni silicijski gel pogodan je za odvajanje hidrofilnih malih molekula.

◆ Frakcijsko odvajanje polisaharida: Kromatografski stupac može se koristiti za frakcijsko odvajanje polisaharida. Prema veličini molekula polisaharida i granašana struktura lanca, odgovarajuće kromatografske tehnike mogu se odabrati za odvajanje polisaharidnih smjesa na različite razine, što je korisno za daljnje proučavanje odnosa između strukture i funkcije polisaharida.

◆ Ostale aplikacije: Kromatografski stupci se također široko koriste u odvajanju i ekstrakciji unutarćelijskih proizvoda nakon lomljenja stanica, odvajanju i pročišćavanju aktivnih komponenti u biljnim ekstraktima, odvajanju i pročišćavanju antibiotika, odvajanju i pročišćavanju enzima, pročišćavanju antitijela, te odvajanju i koncentraciji virusa. Pored toga, kromatografski stupac također igra važnu ulogu u odvajanju i analizi petrokemijskih proizvoda, odvajanju i otkrivanju aditiva za hranu, odvajanju i pročišćavanju kozmetičkih sirovina, klasifikacijskoj analizi polimernih materijala i odvajanju i pročišćavanju prirodnih začina.