Centrifuga male brzine
Opis
Tehnički parametri
A centrifuga s malim brzinamavrti se za stvaranje centrifugalne sile koja u uzorku odvaja komponente različitih gustoća. Tijekom razdvajanja stanica, stanice, fragmenti stanica i ostale biomolekule razdvojene su na različita mjesta centrifugalnom silom, ovisno o njihovoj masi i gustoći. Konkretno, kada se cijev za uzorak okreće velikom brzinom unutar rotora centrifuge, centrifugalna sila na različite komponente smjese proporcionalna je njihovoj masi, a utječe i brzina i polumjer rotacije. Veće stanice ili čestice bacaju se prema dnu cijevi centrifuge, dok manje komponente ostaju u gornjem sloju. Ovaj princip razdvajanja na temelju gustoće i mase čini centrifuge male brzine idealnim alatom za odvajanje stanica.
Postupak centrifuge male brzine u razdvajanju stanica
| ◇Priprema uzorka: Prvo, trebate pripremiti uzorak stanice da biste se razdvojili. To obično uključuje stanične kulture, uzorke krvi ili druge biološke uzorke koji sadrže stanice. Osigurajte da je uzorak pravilno obrađen prije centrifugiranja, poput razrjeđivanja, probave ili filtracije. ◇ Odaberite desnu cijev za centrifugu: Odaberite desnu cijev za centrifugu prema volumenu uzorka i potrebne centrifugalne sile.Centrifuga male brzineS obično podržava razne cijevi za centrifugu, poput 15 ml, 50 ml ili 100 ml. Osigurajte da je centrifugalna cijev dobre kvalitete i zapečaćena kako bi se izbjeglo curenje tijekom centrifugalnog postupka. ◇Uzorci uravnoteženja: Prije stavljanja uzoraka u centrifugu, morate osigurati da su uzorci u svim epruvetama centrifuge jednake ili slične mase. To se može postići vaganjem mase uzorka u svakoj cijevi centrifuge. Ravnoteža uzorka ključna je kako bi se spriječilo da centrifuga stvara vibracije i buku tijekom rada. |
|
|
|
◇ Postavite centrifugalne parametre: Prema eksperimentalnim zahtjevima, postavite odgovarajuću centrifugalnu brzinu i vrijeme. Raspon brzine centrifuga niske brzine obično je između 300rpm i 10, 000 okretaja, a vrijeme se može prilagoditi prema vrsti uzorka i željenom efektu odvajanja. ◇ Pokrenite centrifugu: Stavite uravnoteženu cijev za centrifugu u rotor centrifuge i zatvorite poklopac centrifuge. Zatim započnite centrifugu i centrifugu prema postavljenim parametrima. Tijekom procesa centrifuge obratite pažnju na stanju centrifuge kako biste osigurali da ne postoji nenormalna vibracija ili buka. ◇ Prikupite i obrađuju uzorke nakon razdvajanja: Nakon centrifugiranja, isključite centrifugu i pričekajte da se potpuno zaustavi. Centrifuge cijev se zatim pažljivo uklanja, a supernatant i talog ćeliji prikupljaju se u zasebne spremnike pomoću odgovarajućeg alata, poput pipete. Ovisno o potrebama eksperimenta, oborine stanica mogu se dodatno očistiti, kultivirati ili analizirati. |
Razmatranja centrifuge male brzine u razdvajanju stanica
● Odabir prave centrifugalne brzine i vremena: Izbor brzine i vremena presudan je za učinkovitost razdvajanja stanica. Previsoka brzina rotacije može dovesti do puknuća ili oštećenja stanica, dok predugo vrijeme može dovesti do agregacije stanica ili nepotpunih oborina. Stoga bi se odabir centrifugalnih parametara trebalo razmotriti prema vrsti, veličini i gustoći stanica.
● Osigurajte ravnotežu uzorka: Ravnoteža uzorka ključ je za sprečavanje centrifuge da generira vibraciju i buku tijekom rada. Pri postavljanju uzoraka potrebno je osigurati da su uzorci u svim epruvetama centrifuge jednake ili slične mase. Ako postoji velika razlika u kvaliteti uzorka, u svjetliju cijev za centrifugu može se dodati odgovarajuća količina pufera ili normalne fiziološke otopine kako bi se postigla ravnoteža.
● Odaberite desnu cijev za centrifugu: Kvaliteta i zategnutost cijevi centrifuge također imaju važan utjecaj na učinkovitost razdvajanja stanica. Visokokvalitetne centrifugalne cijevi imaju dobru otpornost na brtvljenje i koroziju, što može učinkovito spriječiti istjecanje i kontaminaciju uzorka. Istodobno, specifikacija centrifugalne cijevi također treba odabrati u skladu s volumenom uzorka i potrebne centrifugalne sile.
● Obratite pažnju na održavanje i održavanje centrifuge: Redovito čistite centrifugalnu komoru i rotor centrifuge kako bi se spriječilo zaostalu kontaminaciju uzorka. Obrišite čisto vrijeme nakon upotrebe kako biste izbjegli koroziju uzrokovanu tekućim ostacima. Istodobno, također je potrebno redovito provjeravati kabel napajanja i priključiti i druge komponente centrifuge kako biste osigurali da su netaknute i izbjegavaju sigurnosne opasnosti.
Primjena centrifuge male brzine u biotehnologiji
● Liječenje stanica u genetskom inženjerstvu: U genetskom inženjerstvu stanice se često trebaju uzgajati, transficirati, pregledavati i druge tretmane. Centrifuge niske brzine mogu se koristiti za korake kao što su koncentracija i ispiranje staničnih suspenzija, kao i prikupljanje stanica nakon transfekcije. Centrifugiranjem mogu se ukloniti nečistoće i netraficirane stanice u mediju stanične kulture, a učinkovitost i čistoća transfekcije gena može se poboljšati.
● Pročišćavanje i izolacija proteina: U istraživanju proteina specifični proteini moraju biti pročišćeni iz složenih bioloških uzoraka. Centrifuge niske brzine mogu se koristiti za početno pojašnjenje proteinskih otopina i uklanjanje nečistoća, poput staničnih krhotina, nukleinskih kiselina, itd. Centrifugalnim liječenjem može se dobiti relativno čista otopina proteina, što pruža osnovu za sljedeće korake pročišćavanja.
● Izolacija i pročišćavanje čestica virusa: Čestice virusa obično imaju specifičnu gustoću i veličinu i mogu se razdvojiti i pročistiti centrifugima male brzine. Na primjer, u virološkim istraživanjima virusne čestice mogu se odvojiti od staničnih kultura koristeći diferencijalnu centrifugiranje. Ova metoda koristi razlike u centrifugalnim silama pri različitim brzinama kako bi se odvajale virusne čestice od ostalih staničnih komponenti.
● Kontrola proizvodnje i kvalitete bioloških lijekova: U proizvodnom procesu bioloških lijekova, centrifuge male brzine često se koriste za pojašnjenje tekućine stanične kulture, uklanjanje staničnih otpada i početno odvajanje proizvoda lijeka. Pored toga, u kontroli kvalitete lijekova, centrifuge male brzine mogu se koristiti i za otkrivanje ključnih pokazatelja kao što su raspodjela veličine i stabilnost čestica lijeka.
Primjena centrifuge male brzine u odvajanju čestica virusa
◇ Primarno razdvajanje: Centrifuge male brzine često se koriste za primarno odvajanje čestica virusa. U procesu ekstrakcije virusa, velike čestice poput staničnih fragmenata i nečistoća mogu se ukloniti centrifugiranjem male brzine, a može se dobiti relativno čista suspenzija virusa. Ovaj korak olakšava sljedeće korake pročišćavanja.
Obogaćivanje virusa: U nekim se slučajevima centrifuge male brzine također mogu koristiti za obogaćivanje virusa. Podešavanjem vremena i brzine centrifuge, čestice virusa mogu se odlagati na dnu cijevi centrifuge, tako da se koncentrirani uzorak virusa može dobiti ekstrakcijom supernatanta. Međutim, treba napomenuti da je učinak obogaćivanja centrifuga niske brzine relativno ograničen, a u prilikama kada su potrebni virusi visoke čistoće, obično su potrebne druge metode pročišćavanja.
U kombinaciji s drugim metodama pročišćavanja
● Diferencijalna centrifugalna metoda: Diferencijalna centrifugalna metoda je metoda razdvajanja čestica različitih veličina i gustoća pomoću različitih brzina i centrifugalnih vremena. Diferencijalna centrifugiranje često se koristi za daljnje uklanjanje nečistoća i koncentraciju virusa tijekom pročišćavanja virusa. Nakon uklanjanja velikih čestica kao što su organele centrifugiranjem male brzine, čestice virusa su taložene centrifugiranjem velike brzine.
● Metoda centrifugiranja gradijenta gustoće: Metoda centrifugiranja gradijenta gustoće je upotreba medija različitih gustoća za stvaranje gradijenta, tako da se čestice različitih gustoća smještaju na različite položaje u metodi gradijenta. U pročišćavanju virusa, centrifugiranje gradijenta gustoće često se koristi za odvajanje čestica virusa od ostalih nečistoća slične gustoće (poput proteina, nukleinskih kiselina itd.). Pripremajući gradijent gustoće u epruveti za centrifugu unaprijed, a zatim dodavanjem suspenzije virusa na površini gradijenta za centrifugiranje, čestice virusa naseljavat će se u određenom položaju u gradijentu kako bi se stvorila zona sedimentacije.
● Metoda oborina: Metoda oborina je taloženje čestica virusa dodavanjem kemijskih reagensa. Uobičajena agensi za taloženje uključuju amonijev sulfat, polietilen glikol (PEG) itd. Metoda oborina može se koristiti za daljnje pročišćavanje virusa. Podešavanjem koncentracije i pH vrijednosti taloga, čestice virusa mogu se selektivno istaknuti kako bi se uklonile nečistoće.
● Metoda filtracije: Metoda filtracije metoda je odvajanja čestica virusa od ostalih nečistoća stupcem gel filtracije kromatografije. Kromatografski stupac filtra gela odvojen je prema veličini čestica, a velike molekule izlaze iz kromatografskog stupca prvo, a male molekule izlaze kasnije. Odabirom odgovarajućih gela i kromatografskih stanja, čestice virusa mogu se učinkovito odvojiti od ostalih nečistoća.
● Elektroforetska metoda: Elektroforetska metoda je upotreba djelovanja električnog polja za izradu nabijenih čestica u metodi migracije električnog polja. U pročišćavanju virusa elektroforeza se često koristi za odvajanje virusnih čestica od ostalih nabijenih nečistoća. Učinkovito odvajanje i pročišćavanje čestica virusa može se postići odabirom odgovarajućih uvjeta elektroforeze i medija.
Popularni tagovi: Centrifuga niske brzine, Kina proizvođači centrifuge niske brzine, dobavljači, tvornica
Pošaljite upit
